凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸硝化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收,再以標準酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。
杜馬斯燃燒法是將一定量的樣品封裝在鋁舟中,然后在高溫爐中進行燃燒;在催化劑和氧氣的環(huán)境中,樣品燃燒后生成的氣體為:CO2、H2O、NOx;這些氣體再經(jīng)過還原爐后,NOx被還原為N2,而CO2和H2O分離開;后氮元素被熱傳導(dǎo)檢測器(TCD)來測量出含量。全部測量過程在3分鐘內(nèi)完成。
兩種方法的實驗原理既有相同點,也有不同之處:
相同點:
兩種方法都是基于食品中蛋白質(zhì)含量與食品中氮含量的比例關(guān)系換算的。如乳中蛋白質(zhì)與氮含量的比值為6.38,大豆中蛋白質(zhì)與氮含量的比值為5.71,普通食品中蛋白質(zhì)與氮含量的比值為6.25。因此,兩種方法均是通過測定食品中氮含量后再根據(jù)換算系數(shù)得到食品中蛋白質(zhì)含量。
不同點
凱氏定氮法:樣品在高溫濃硫酸的消化作用下,將樣品中的有機氮轉(zhuǎn)化為無機銨,待消化液冷卻后,加入過量的堿,使無機銨轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性的氨,再將氨蒸出后,利用鹽酸標準溶液滴定,后根據(jù)消耗的鹽酸標液體積推算樣品中的氮含量。
杜馬斯定氮法:樣品在高純氧中充分燃燒的過程中,將氮元素轉(zhuǎn)化為氮氣或氮氧化物,再經(jīng)過高溫銅的還原,使所有的氮轉(zhuǎn)化為N2,然后利用熱導(dǎo)檢測器檢測N2的含量來推算樣品中氮含量。因此杜馬斯定氮法也稱為杜馬斯燃燒法或燃燒定氮法。
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